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本产品是一种主要用于ELISA等实验中TMB显色反应终止的比较安全的不含硫酸的即用型酸性溶液。加入本产品后，TMB显色反应会被终止，并且原来的蓝色溶液会并转变成在450nm处有较强光吸收的黄色溶液，最终在450nm测定吸光度并且可以使检测灵敏度比检测蓝色吸光度提高1倍左右。

本产品相对比较安全。2M硫酸是最常用的TMB显示终止液，但由于其腐蚀性极强而有较大的安全隐患。本产品不含硫酸，使用了相对更加安全的适当中强酸，可以有效避免硫酸的强腐蚀性可能对人体造成的伤害。需要注意的是本产品作为中强酸，虽然腐蚀性比硫酸弱很多，但还是有一定的腐蚀性，需要注意适当防护。

由于辣根过氧化物酶与TMB的反应在一定时间内能持续进行，若不及时终止反应，可能会由于反应达到平台期等而影响实验结果。TMB显色终止液根据吸光度的检测分为两种，一种是在450nm进行检测，一种是在620～650nm进行检测。本TMB显色终止液加入后溶液颜色从蓝色变为黄色，并在450nm测定吸光度，本产品终止反应后在1小时内吸光度保持稳定。加入TMB显色液及加入TMB显色终止液(450nm，不含硫酸)后的吸光度检测和实拍显色效果图参考图1。

图1.本产品的检测效果图。左图为不同浓度的HRP标记的二抗(辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG)，加入TMB显色液(YT076)室温反应5分钟后A370的吸光值，及加入TMB显色终止液(450nm，不含硫酸) A450的吸光值的线性图。右图为两者的实拍显色效果图。图中数据仅供参考，实际的检测效果可能会略有不同。


TMB显色终止液(450nm，不含硫酸，货号：YTB0715)与TMB显色终止液(650nm，无腐蚀性，货号：YTB0717)的主要区别如下：

货号	YTB0715	YTB0717
产品名称	TMB显色终止液(不含硫酸)	TMB显色终止液(无腐蚀性)
最终溶液颜色	黄色	蓝色
检测波长	450nm	620～650nm
吸光度信号	提高约一倍	无明显变化
安全性	有一定腐蚀性	无腐蚀性

组分	100mL	500mL
TMB终止液(不含硫酸)	100mL	500mL
说明书	1份

保存：4℃，一年有效。


96孔板每孔使用100μL，本试剂盒小包装100mL可以进行1000个终止反应，稍大的包装500mL可以进行5000个终止反应。

• 对于ELISA等实验中TMB显色反应的终止：
  
  • 参考ELISA试剂盒的实验步骤，在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后，用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5分钟。
    
  • 洗涤完毕后，去除洗涤液，加入100μL TMB显色液。
    
  • 室温避光孵育3～30分钟或更长时间，直至显色至预期深浅。
    
  • 加入100μL TMB显色终止液，随后在450nm测定吸光度。
• 对于在96孔板内进行的其它适当检测(如检测组织或细胞样品内源性的过氧化物酶)：
  
  • 在96孔板内每孔加入10～20μL样品。
    
  • 加入100μL TMB显色液。
    
  • 室温避光孵育3～30分钟或更长时间，直至显色至预期深浅。
    
  • 加入100μL TMB显色终止液，随后在450nm测定吸光度。加入TMB显色液及加入TMB显色终止液后的吸光度检测和实拍显色效果图参考图1。

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